【概述】肝微粒體CYP450酶活性種屬差異研究

藥物代謝研究貫穿整個(gè)新藥研發(fā)周期，從發(fā)現(xiàn)階段、臨床前開發(fā)到臨床開發(fā)和上市后均需進(jìn)行相應(yīng)代謝研究。藥物代謝研究一般分為體內(nèi)代謝研究和體外代謝研究。與體內(nèi)代謝研究相比，體外代謝研究課直接觀察候選化合物與受試靶點(diǎn)的選擇性作用，不需要消耗大量的樣品和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，操作快速便捷，適用于代謝信息不明確的候選化合物進(jìn)行高通量篩選。

目前，體外代謝研究已被廣泛應(yīng)用于新藥早期的代謝評(píng)價(jià)中，主要涉及代謝穩(wěn)定性、代謝酶亞型研究以及代謝相互作用等，肝微粒體是其中最重要的研究工具。肝微粒體由人或動(dòng)物組織通過勻漿和離心制備，富含CYP450酶，其對(duì)肝微粒體酶活性貢獻(xiàn)主要力量。考慮到種屬之間的外推，了解細(xì)胞色素P450酶亞家族酶活的相似性和/或差異是較為重要的，以便選擇合適的種屬用于體外和體內(nèi)研究。

迄今為止，已有許多研究比較各種屬CYP450酶活性之間的差異，但多數(shù)為2-3種種屬或者1-2種探針底物。Bogaards等人在同一個(gè)研究體系中研究了7個(gè)種屬中9種CYP450酶活性的種屬差異^[1],這些亞型酶種類與FDA和CDE在有關(guān)體外藥物相互作用指導(dǎo)原則中所推薦研究的CYP450酶類別基本一致^[2][3]。本文簡單介紹Bogaards等人的研究成果，以供參考。Boddards等人研究了小鼠、大鼠、兔、狗、小型豬、猴和人微粒體中CYP1A2、CYP2A6、CYP2B6、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1、CYP3A、CYP4A的活性，檢測這些酶的活性依次所用探針底物為乙氧基試鹵靈（7-Ethoxyresorufin）、 （Coumarin）、7-乙氧基-4-(三氟甲基)     7-Ethoxy-4-trifluoromethycoumarin）、雙氯芬酸（Diclofenac）、美芬妥因(S-mephenytoin)、丁呋洛爾（Bufuralol）、氯唑沙宗(Chlorzoxazone) 睪酮(Testosterone)、月桂酸(Lauric acid)。檢測結(jié)果見表1-表2。

表1 CYP1A2、CYP2A6、CYP2B6、CYP2C9、CYP2C19酶活檢測結(jié)果

表2 CYP2D6、CYP2E1、CYP3A、CYP4A酶活檢測結(jié)果

對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析，酶活與人較為相似的物種見表3。

表3 CYP酶活與人較為相似的物種

肝微粒體是體外研究一個(gè)化合物的代謝(酶抑制，清除率和代謝鑒定)以及藥物-藥物相互作用的主要工具。齊氏生物提供的肝細(xì)胞微粒體，每批產(chǎn)品都經(jīng)過嚴(yán)格的制備、檢測，確保批次間穩(wěn)定性，然后于凍存管包裝，10 mg/管；-80℃保存，干冰運(yùn)輸。

參考文獻(xiàn)

[1] Bogaards JJ, Bertrand M, Jackson P, et al., Determining the best animal model for human cytochrome P450 activities: a comparison of mouse, rat, rabbit, dog, micropig, monkey and man. Xenobiotica. 2000; 30:1131-52.

[2] FDA. Guidance for Industry: In Vitro Drug Interaction Studies - Cytochrome P450 Enzyme- and Transporter-mediated Drug Interactions, 2020.

[3] CDE. 藥物相互作用研究指導(dǎo)原則(試行), 2021。